初級(jí)中藥師輔導(dǎo)：黃酮類(lèi)化合物的分離

　　初級(jí)中藥師輔導(dǎo)：黃酮類(lèi)化合物的分離

　　分離的基本依據(jù)：

　　極性差異、酸性強(qiáng)弱、分子大小和特殊結(jié)構(gòu)。

　　1、溶劑萃取法

　　2、PH梯度法：用不同濃度的堿分離

　　3、柱色譜法

　　(1)硅膠柱色譜法

　　適于分離異黃酮，二氫黃酮(醇)和高度甲基化或乙?；狞S酮及黃酮醇類(lèi)。

　　分離苷元時(shí)：氯仿-甲醇混合溶劑洗脫。

　　分離苷時(shí)：氯仿-甲醇-水或乙酸乙酯-丙酮-水

　　(2)聚酰胺柱色譜

　　適于黃酮類(lèi)化合物的分離。

　　原理：氫鍵吸附學(xué)說(shuō)，即聚酰胺的吸附作用是通過(guò)其酰胺羰基與黃酮類(lèi)化合物上的酚羥基形成氫鍵締合而產(chǎn)生的，其吸附強(qiáng)度取決于黃酮類(lèi)化合物分子中酚羥基的數(shù)目與位置等及溶劑于黃酮類(lèi)化合物或與聚酰胺之間形成氫鍵?合能力的大小。

　　規(guī)律：

　　A：與酚羥基的數(shù)目有關(guān)，數(shù)目越多，吸附力越強(qiáng)。如：桑色素的吸附力強(qiáng)于山奈酚

　　B：與酚羥基的位置有關(guān)，如果酚羥基所處的位置易形成分子內(nèi)氫鍵，則吸附力減弱。如：大豆素的吸附力強(qiáng)于卡來(lái)可新

　　C：分子內(nèi)芳香化程度越高，共軛雙鍵越多，則吸附力越強(qiáng)。查耳酮吸附力強(qiáng)于二氫黃酮

　　D：不同類(lèi)型黃酮類(lèi)化合物，被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋狐S酮醇>黃酮>二氫黃酮醇>異黃酮。

　　E、苷元相同時(shí)，以含水移動(dòng)相洗脫，被吸附的強(qiáng)弱順序?yàn)椋?苷元>單糖苷>雙糖苷>?糖苷。如果以有機(jī)溶劑作洗脫劑，結(jié)果則相反。

　　F：洗脫溶劑的影響：洗脫能力由弱到強(qiáng)的順序?yàn)椋?/p>

　　水-甲醇或乙醇(濃度由低到高)-丙酮-稀氫氧化鈉水溶液或氨水-甲酰胺-二甲基甲酰胺-尿素水溶液

　　(3)葡聚糖凝膠色譜法

　　凝膠類(lèi)型：Ssephadex LH-20和Sephadex G兩種類(lèi)型的凝膠。

　　分離苷元時(shí)：利用吸附作用，游離酚羥基數(shù)目越多，則吸附力越強(qiáng)，越難洗脫。

　　分離苷時(shí)：主要靠分子篩，洗脫時(shí)按苷分子量由大到小的順序依次被洗脫出柱體。

　　常用的洗脫劑：堿性水溶液，含鹽水溶液、醇及含水醇

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