初級檢驗技士考試輔導(dǎo)：支原體及其檢驗
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初級檢驗技士考試輔導(dǎo)：支原體及其檢驗$lesson$
支原體及其檢驗
一、概述
(一)概念
支原體是一類無細胞壁、呈高度多形態(tài)性，能通過除菌濾器，在人工培養(yǎng)基上能生長繁殖的最小原核細胞型微生物。
(二)分類與命名
支原體種類繁多，自然界分布廣泛。分為兩個屬：一為支原體屬，有幾十個種，對人類有致病性的主要為肺炎支原體、人型支原體、生殖道支原體、穿通支原體等;另一為脲原體屬，僅有一種，解脲脲原體，對人類有致病性。
(三)生物學(xué)性狀
1、形態(tài)與結(jié)構(gòu)
支原體個體微小，大小約為0.2～0.3um，可通過濾菌器，呈高度多態(tài)性，有球形、桿狀、分支絲狀等。革蘭染色為陰性，但不易著色，故常用Giemsa染色法染成淡紫色。
無細胞壁，僅有細胞膜，是與細菌區(qū)別的主要特點。
支原體的細胞膜，有外、中、內(nèi)三層，內(nèi)外兩層主要為蛋白質(zhì)，中間層為脂質(zhì)，膽固醇含量較多。凡能作用于膽固醇的物質(zhì)(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。
2、培養(yǎng)特性
支原體大多數(shù)需要氧或兼性厭氧，通常在含95%N2、5%CO2環(huán)境中生長良好。營養(yǎng)要求比一般細菌高，可在含牛心浸液、馬血清與酵母浸液的培養(yǎng)基上生長。支原體與脲酶體對最適pH要求不同，支原體最適pH7.8～8.0之間，低于7.0則死亡，但解脲脲原體最適pH6.0～6.5。
支原體的菌落特征與細菌L型菌落極相似，37℃培養(yǎng)3-10天可形成直徑為0.2-0.5mm大小的菌落，低倍鏡觀察，菌落呈“荷包蛋”樣，即中央部分較厚，不透明，向下長入培養(yǎng)基內(nèi)，周邊為一層薄薄的透明顆粒區(qū)。
支原體有許多特性與細菌L型相似，如多形性、可通過濾菌器、對低滲敏感、菌落呈“荷包蛋”樣。兩者不同點在于細菌L型在無抗生素等誘導(dǎo)因素作用下，易返祖為原菌，而支原體為獨立的一類微生物，不出現(xiàn)返祖現(xiàn)象。
3、生化反應(yīng)
常以發(fā)酵葡萄糖、水解氨基酸和尿素等生物特性不同，作為初步鑒別支原體的依據(jù)。
肺炎支原體、生殖道支原體等可分解葡萄糖產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，人型支原體等不能分解葡萄糖，但可利用氨基酸產(chǎn)NH3。解脲脲原體不能利用葡萄糖或精氨酸，但可利用尿素作能源，分解尿素產(chǎn)堿。
支原體進一步鑒別的依據(jù)：四氮唑還原能力、亞甲藍抑制、溶解紅細胞、吸附紅細胞等生物學(xué)特性不同。
4、抗原成分
支原體的抗原性主要來自細胞膜，其外層蛋白質(zhì)是主要的型特異性抗原，具有免疫原性。應(yīng)用生長抑制試驗(GIT)和代謝抑制試驗(MIT)等利用針對此抗原的型特異性血清來抑制支原體培養(yǎng)基上生長，可鑒定支原抗原，進行血清分型。
5、抵抗力
支原體對熱的抵抗力與細菌相似，有的較弱。支原體無細胞壁，對環(huán)境滲透壓敏感，滲透壓的突變可致細胞破裂。對重金屬鹽、石炭酸、來蘇爾和一些表面活性劑較細菌敏感，但對醋酸鉈、結(jié)晶紫和亞銻酸鹽的抵抗力比細菌大。對影響壁合成的抗生素如青霉素不敏感，但紅霉素、四環(huán)素、鏈霉素及氯霉素等，作用于支原體核蛋白體的抗生素，可抑制或影響蛋白質(zhì)合成，有殺滅支原體的作用。
(三)微生物學(xué)檢驗
由于支原體無固定形態(tài)，染色結(jié)果不易與標本中的組織碎片等雜物區(qū)別，故取患者標本直接鏡檢對各種支原體的診斷意義不大。微生物檢驗方法主要靠分離培養(yǎng)與血清學(xué)檢驗。