2013檢驗主管技師考試臨床化學:血清蛋白質的電泳分析
點擊進入:2013年檢驗技師考試時間:5月18、19、25、26
醋酸纖維薄膜(ACM)和瓊脂糖凝膠是目前最廣泛采用的兩類介質。巴比妥緩沖液pH8.6,離子強度0.05,標本用量3-5μl,標準電泳條件為CAM每厘米寬電流0.75mA,瓊脂糖約為每厘米寬10mA,電泳時間40-60分鐘,電泳前沿達6cm左右。雖然目前已開展和應用不少個別蛋白質的測定方法,但血漿蛋白質電泳圖譜至今仍然是了解血漿蛋白質全貌的有價值的方法,可用為初篩試驗,以提供較全面的信息。正常血清電泳后可以很好地分為5條區(qū)帶(Alb、α1、α2、β1、β2),新鮮標本可以分出β帶(以C3成分為主)。由于各條區(qū)帶中各個蛋白質組分的重疊、覆蓋(如CER常被α2MG及 Hp所掩蓋),以及某些蛋白質染色帶很淺(如脂蛋白和α1糖蛋白),可以用其它染色方法輔助。目前除了常使用的氨基黑和麗春紅染料外,還采用靈敏度更高的考馬亮藍。
用血清蛋白質電泳測定各組分的含量,通常可采用各區(qū)帶的濃度百分比(%)或絕對濃度(g/L)表示之。
用醋酸纖維薄膜電泳測得正常小兒及成人血清蛋白質的參考值可參見表2-7。
在疾病情況下血清蛋白質可以出現(xiàn)多種變化。根據(jù)它們在血清蛋白質電泳圖譜上的異常特征,不少學者曾試將其分為以下類型,參見表2-8及圖2-1。
表2-7 各年齡組血清蛋白質電泳正常值(X±SD)范圍
總蛋白質(g/L) | 蛋白質各組分的濃度比(%) | |||||
白蛋白 | α1 | α2 | β | γ | ||
臍帶血 | 57 | 69.4 | 2.5 | 5.4 | 7.0 | 15.4 |
±12 | ±5.6 | ±1.0 | ±1.6 | ±2.4 | ±4.4 | |
新生兒 | 60 | 64.2 | 3.5 | 14.1 | 9.2 | 6.2 |
±12 | ±13.2 | ±3.6 | ±2.1 | ±2.4 | ±4.8 | |
1-5歲 | 68 | 65.2 | 3.1 | 11.2 | 10.2 | 10.4 |
±11 | ±7.8 | ±1.3 | ±2.7 | ±2.6 | ±5.5 | |
6-12歲 | 69 | 61.7 | 3.0 | 10.5 | 10.2 | 14.7 |
±14 | ±6.1 | ±1.8 | ±3.4 | ±2.0 | ±5.8 | |
成人△1 | 64 | 2.8 | 6.6 | 7.2 | 14.4 | |
45-78 | 0.8-6.2 | 3.4-12 | 4.8-14 | 7.0-25 | ||
2 | 64 | 2.8 | 5.9 | 9.8 | 17.5 | |
55-71 | 0.9-4.8 | 2.6-9.2 | 6.3-13.3 | 12.2-22.3 | ||
3 | 68.7 | 3.1 | 6.0 | 8.2 | 13.8 | |
53-76.6 | 1.3-5.0 | 2.7-9.9 | 5.5-14.9 | 8.8-21.3 | ||
4 | 62.2 | 4.2 | 6.6 | 10.2 | 17.33 | |
47-77 | 0.7-7.6 | 2.4-10.8 | 4-16.4 | 8.8-25.7 | ||
5 | 65.7 | 2.28 | 5.7 | 8.8 | 17.5 | |
58.8-72.7 | 0.7-3.8 | 3.6-7.8 | 6.3-11.3 | 12.3-22.7 |
△資料取自不同作者:①上海醫(yī)科大學n=50;②重慶醫(yī)科大學n=123;③同濟醫(yī)科大學n=132;④蘇州醫(yī)學院n=100;⑤湖南醫(yī)科大學n=100
表2-8 異常血清蛋白質電泳圖譜的分型及其特征
的圖譜類型 | 總蛋白質 | Alb | α1 | α2 | β | γ | ||
1.低蛋白血癥 | ↓↓ | ↓↓ | N↑ | N | ↓ | N↑ | ||
2.腎病型 | ↓↓ | ↓↓ | ↑ | ↑↑ | 不定 | |||
3.肝硬化型 | ↓N↑ | ↓↓ | N↓ | N↓ | β-γ↑(融合) | |||
4.急性炎癥或急性時相反應癥 | N | ↓N | ↑ | ↑ | N | |||
5.慢性炎癥型 | ↓ | ↑ | ↑ | ↑ | ||||
6.彌漫性肝損害型 | ↓N | ↓↓ | ↑↓ | ↑ | ||||
7.彌漫寬γ球蛋白血癥型 | ↑ | ↓N | ↑↑ | |||||
8.M蛋白血癥型 | 在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)M蛋白峰-M區(qū)帶峰 | |||||||
9.高α2(β)-球蛋白血癥 | ↓ | ↑↑ | ↑ | |||||
10.妊娠型(高α型) | ↓N | ↓ | ↑ | ↑ | N | |||
11.蛋白質缺陷型 | 個別區(qū)帶出現(xiàn)特征性缺乏 |
上述電泳圖譜分型有助于臨床疾病判斷的參考。在某些蛋白質異常增多的情況下,可出現(xiàn)異常區(qū)帶。如高濃度的αFP可以在Alb與α1區(qū)帶間出現(xiàn)一條清晰的新帶(有人稱之為肝癌型);CRP異常增高可出現(xiàn)特殊界限的γ區(qū)帶;單核細胞白血病可出現(xiàn)由于溶菌酶異常增多的γ后區(qū)帶等;單克隆免疫球蛋白異常癥(M蛋白血癥)則在α-γ區(qū)帶中出現(xiàn)一條很深的界限截然的M區(qū)帶。
在大劑量使用青霉素或水楊酸等藥物時,由于藥物與白蛋白的結合,可導致這部分白蛋白電泳遷移率的加快而出現(xiàn)區(qū)帶狀的改變。
急性時相反應型常以α1及α2區(qū)帶加深為特征;妊娠型以α1區(qū)帶增高為特征,伴有β區(qū)帶的增高;以α2區(qū)帶增高為特征的圖譜常見于風濕病等免疫反應性疾病。其它慢性炎癥則同時有α1、α2及γ-球蛋白的增加。在肝硬化及慢性肝炎伴肝硬化及慢性肝炎伴肝硬化可以出現(xiàn)β、γ區(qū)帶融合彌散的寬γ帶。慢性遷延型肝炎、慢性活動型肝炎及慢性反復感染可以出現(xiàn)多條γ區(qū)帶的加深。
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