2014初級檢驗技士考試:交叉配合試驗方法及意義
傳統(tǒng)的交叉配合(crossmatching)試驗是檢測受者體內是否存在抗供者的特異性抗體,現(xiàn)在可同時檢測受者對供者LD抗原的相容程度。不管是否已經進行過各種HLA分型試驗,交叉配合試驗對選擇移植物都有一定的參考價值。
1.微量細胞毒試驗:用供者的淋巴細胞作靶細胞,與受者的血清進行CDC;出現(xiàn)陽性反應說明受者體內含有抗供者的特異性抗體,移植后很有可能發(fā)生超急排斥反應。若要明確受者的抗體是抗Ⅰ類抗原還是抗Ⅱ類抗原,可以將供者的淋巴細胞進一步分離出較純的T細胞和B細胞分別進行檢測;若要排除患者自身抗體的影響,可以用患者自己的細胞與自已的血清進行試驗作為對照。
交叉配合是移值前必須做的一個檢驗項目;對一些曾經接觸過移植抗原的受者,例如多次接受輸血者、經產婦、有不成功移植史或接受過血清透析治療者,尤其要進行審慎的檢驗。
2.流式細胞儀檢測:將供者淋巴細胞與受者血清共育后,用熒光標記的抗人Ig對結合有抗體的細胞染色,在流式細胞儀上進行熒光標記測定。該法比微量細胞毒法的靈敏度高100倍,有條件的單位可以優(yōu)先考慮使用。
3.混合淋巴細胞培養(yǎng):將供者與受者的淋巴細胞做雙向混合培養(yǎng),或者滅活供者的淋巴細胞做向混合培養(yǎng),細胞反應的程度與供-受者相容的程度呈負相關。
4.細胞介導的淋巴細胞毒試驗:檢測受者對移植物可能發(fā)生的細胞介導的淋巴細胞毒作用(cell-mediatedlymphocytotoxicity,CML)。將受者淋巴細胞與滅活的供者淋巴細胞做常規(guī)單向MLC,收獲致敏的受者淋巴細胞后,再與51Cr標記的、PHA刺激的供者淋巴細胞做CML試驗;51Cr釋放的程度與供-受者相容程度呈負相關
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